實驗技巧
凍存的細胞該如何開始培養？
作者：admin2022-05-31 11:05
熱度：387
1、將一管細胞從液氮罐中取出，注意保護手和眼睛。
2、用 10 秒鐘時間將小管的蓋子擰松 1/4 以去除殘留在螺紋處的液氮，然后將蓋子蓋緊。
3、將小管放入 37℃水浴中，輕輕握住并旋轉，直到管內物體完全融化。
4、將小管立即從水浴中拿出，擦干，轉入無菌環境。
5、用 70%的酒精沖洗小管，然后擦去多余酒精。
6、打開蓋子，注意手指不要碰到里面的螺紋。用 1ml 離心管離心內容物。
7、平衡管內物，用多聚賴氨酸包被培養瓶(多數細胞用 T-75 的培養瓶)。多數細胞類型推
薦接種密度為每平方厘米 5000 細胞。
8、蓋好蓋子，輕輕搖晃培養瓶以使細胞分布均勻。若需要氣體交換可打開蓋子。
9、將培養瓶放放培養箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)
10、植入培養后第 6-16 小時更換一次培養基以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細胞。