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病理實驗

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天狼猩紅染色

一、原理

天狼猩紅和其襯染液都是強酸性染料,易與膠原分子中的堿性基團結合,吸附牢靠。偏振光鏡檢查,膠原纖維有正的單軸雙折來射光的屬性,與天狼星紅染色液結合后,可增強雙折射,提高分辨率,從而區分兩型膠原源纖維。


二、實驗流程

石蠟切片脫蠟至水→天狼猩紅染色→脫水封片→鏡檢


三、實驗結果

光學顯微鏡下膠原纖維紅色,背景黃色;偏振光下,Ⅰ型膠原呈橘黃色或亮紅色的粗纖維,Ⅲ型膠原呈綠色的細纖維。


四、注意事項

①做石蠟包埋樣本保存及運輸:常溫置于4%多聚甲醛固定液內保存及運輸(需注意固定液的量最好是組織的10倍以上,樣本需完全浸泡于固定液內并防止樣本貼壁固定不良,大標本最好使用大的標本瓶/袋運輸,建議在大標本上按取材包埋要求做多條平行切口,以防標本中心固定不透徹。運輸過程中防止固定液滲漏)。

②做冰凍切片樣本保存及運輸:冰凍切片制片應取用新鮮組織,-80℃或液氮保存,干冰運輸。

③樣本接收:石蠟切片、冰凍切片、細胞爬片


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